# 新型 TSHR 阻斷抗體於葛瑞夫茲病與甲狀腺眼病變小鼠模型中有效降低甲狀腺功能亢進與眼球突出
- **會議／場次：** ENDO 2026／Late-Breaking Oral Abstract/Rapid-Fire I（ORF18）
- **短講：** ORF18-05 — A Novel TSHR Blocking Antibody Effectively Reduces Hyperthyroidism and Proptosis in a Mouse Model of Graves' and Thyroid Eye Disease
- **講者：** Mutayyaba Adnan
## 整理稿
### 研究背景與治療策略
葛瑞夫茲病（Graves' disease, GD）是一種自體免疫疾病，其特徵為體內存在促甲狀腺素受體（thyroid-stimulating hormone receptor, TSHR）刺激性自體抗體（thyroid-stimulating autoantibodies, TSAbs）。例如從 GD 患者體內分離出的 **M22** 抗體，能作為致效劑（agonist）結合至 TSHR，進而刺激甲狀腺過度分泌 T3 與 T4，導致全身性甲狀腺功能亢進（hyperthyroidism）。
在甲狀腺眼病變（thyroid eye disease, TED）方面，這些 TSAbs 同樣會活化眼眶內的纖維母細胞（orbital fibroblasts）與脂肪細胞（adipocytes），促進玻尿酸（hyaluronic acid, HA）的產生與堆積，並引發眼眶脂肪生成（adipogenesis）。超過 30% 的 GD 患者會發展出 TED。
現行標準治療（standard of care, SoC）面臨顯著局限：
* **葛瑞夫茲病（GD）**：抗甲狀腺藥物（antithyroid drugs）、放射性碘治療（radioactive iodine）及甲狀腺切除術（thyroidectomy）皆伴隨安全性風險與耐受性不良等副作用，且**完全無法治療 TED**。
* **甲狀腺眼病變（TED）**：類固醇（steroids）與分期手術介入時間較晚且療效不完全；目前唯一獲准的治療藥物 Teprotumumab（IGF1R 阻斷劑）需要高劑量靜脈注射，並存有耳聾／聽力喪失（hearing loss）的風險。
雖然 GD 與 TED 共享相同的上游致病機制，但目前尚無任何獲准藥物能同時針對這兩種疾病進行治療。研究團隊認為，直接標靶 TSHR 是一種極具吸引力的治療策略。因此，Regeneron 開發出一款新型 TSHR 阻斷抗體，透過直接結合 TSHR 來阻斷 TSHR 下游信號傳遞級聯（signaling cascade）的啟動，期望以單一藥物策略同時治療 GD 與 TED。
Slides 延伸補充：投影片第 4 與 5 頁補充呈現了視丘下部-垂體-甲狀腺軸（HPT axis）與眼眶組織的致病機轉圖解。視丘下部分泌 TRH 刺激前葉垂體釋放 TSH；在 GD 患者體內，B 細胞／漿細胞分泌之 TSAbs（如 M22）同時作用於甲狀腺與眼眶組織。Regeneron 研發之 TSHR 阻斷抗體能上游阻斷此一共同致病路徑。
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### 體外（In Vitro）藥效與結合特性分析
為了評估 TSHR 阻斷抗體抑制 TSHR 活化的效力（potency），研究團隊採用 CRE-Luciferase 報告基因分析（reporter assay），使用基因工程修飾、表現人類 TSHR（hTSHR）的 CHO-K1 細胞株進行測試。
1. **阻斷刺激性自體抗體 M22**：先加入 M22 活化 TSHR（報告基因發光信號上升），隨後加入阻斷抗體 **REGN24493**，觀察到 TSHR 活化呈現**劑量依賴性（dose-dependent）的顯著抑制**。
2. **阻斷天然配體 hTSH**：在人類 TSH（hTSH）活化 TSHR 的實驗中，加入 REGN24493 同樣展現出劑量依賴性的 TSHR 抑制效果。
3. **臨床相關性驗證（GD 患者血清）**：考慮到 GD 患者血清含有多株抗體（polyclonal antibodies），研究團隊測試了 GD 患者血清。結果顯示，REGN24493 能有效阻斷 GD 患者血清對 TSHR 的活化作用。
此外，研究團隊亦以功能性報告基因分析比較刺激性抗體 M22 與天然配體 hTSH 的活化效力（於 HEK293/Fsc11-CRE-luc/hTSHR 細胞株）；此處 EC50 反映功能效力，並非直接的結合親和力測定：
* 天然配體 **hTSH** 的半數有效濃度（EC50）為 **1.351 nM**。
* 刺激性抗體 **M22** 的 EC50 為 **0.205 nM**。
* **臨床意義**：依 EC50 計算，M22 活化 TSHR 的功能效力約為天然配體 hTSH 的 **6.6 倍**，凸顯其強烈的致病活化能力。
Slides 延伸補充：投影片第 6 與 7 頁詳細展示了體外 Reporter Assay 的信號傳遞路徑：TSHR $\rightarrow$ Adenylate Cyclase $\rightarrow$ cAMP $\rightarrow$ PKA $\rightarrow$ CREB $\rightarrow$ Luciferase，並註明詳細體外分析數據可參見展出的 Poster 397（Bristol Denlinger 等人發表）。
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### 建立葛瑞夫茲病與甲狀腺眼病變小鼠模型
為了嚴謹評估體內（in vivo）TSHR 的調控，並探索單純長期給予 M22 是否足以誘發 TED 樣的眼部症狀，研究團隊建立了一款新型小鼠模型：
* **實驗設計**：採用人類化 TSHR 小鼠（humanized TSHR mice），每週兩次腹腔全身性注射 M22（劑量為 **2 mg/kg**）。
* **檢測指標**：利用 ELISA 定量血清 T4 濃度；利用核磁共振造影（MRI）定量眼球突出度（proptosis）。
* **MRI 定量方法**：於眼部 MRI 影像上，繪製頭骨外緣與眼球外緣的輪廓線，計算**眼球突出於頭骨外緣的面積百分比（% protrusion）**。左右眼分別進行紀錄。
#### 實驗結果
1. **甲狀腺功能亢進**：同型對照組（Isotype control）小鼠血清 T4 維持在正常基礎範圍內；而每週兩次注射 2 mg/kg M22 的小鼠，血清 T4 顯著升高，並在整個研究期間持續維持甲狀腺功能亢進狀態。
2. **眼球突出（Proptosis）**：MRI 量化顯示，接受 M22 長期注射的小鼠，其眼球突出百分比（% protrusion）相較於 Isotype 對照組**增加了 18%**（具統計顯著差異）。
3. **結論**：研究成功證實，單純長期給予刺激性抗體 M22，即可在小鼠體內誘發**持續性甲狀腺功能亢進**與**顯著的眼球突出**，成功重現 GD 與 TED 的核心臨床表徵。
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### TSHR 阻斷抗體（REGN23415）於體內降低甲亢與預防眼凸之療效
基於上述建立的模型，研究團隊進一步評估 TSHR 阻斷抗體 **REGN23415** 的治療效果：
#### 1. 劑量遞增與甲亢控制實驗
* **設計**：小鼠先接受 3 次 M22（2 mg/kg）注射以提升 T4 濃度誘發甲亢。自第 4 次 M22 注射起，同時給予阻斷抗體 REGN23415（每週兩次）。劑量初始為 2 mg/kg，隨後調整至 **8 mg/kg**。
* **結果**：給予 REGN23415 後，血清 T4 濃度顯著下降；至 **第 29 天**，T4 濃度完全降至與 Isotype 對照組相當的正常範圍，並持續維持至研究結束（**第 37 天**）。
#### 2. 眼球突出（Proptosis）預防實驗
* **結果**：Isotype 對照組未出現眼凸；M22 + Isotype 對照組展現顯著眼凸（% protrusion 升高）；而結合 REGN23415 治療的組別，則**完全預防了由 M22 誘發的眼球突出**。
#### 3. 固定劑量（8 mg/kg）驗證實驗
* **設計**：確定 8 mg/kg 為有效劑量後，進行另一組固定劑量實驗（每週兩次給予 8 mg/kg REGN23415）。
* **結果**：血清 T4 迅速下降，至 **第 16 天** 即已降至與 Isotype 對照組無異的正常水平，並在後續研究期間維持穩定。
Slides 延伸補充：投影片第 14 頁顯示，M22 誘發組之眼球突出度（% protrusion）自基礎約 35–40% 攀升至 55% 以上，而 REGN23415 治療組之 % protrusion 則始終維持在 35–40% 的 normal baseline 區間。
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### 半衰期延長抗體（REGN24493）之工程改造與藥效持久度比較
為最大化臨床治療持久度，研究團隊將原始阻斷抗體 REGN23415 進行工程修飾以延長其半衰期，命名為 **REGN24493**。
* **實驗設計**：採用人類化 FcRn 小鼠（humanized FcRn mice），每週兩次給予 M22（2 mg/kg）維持 GD/TED 表型，並測試單次高劑量（**35 mg/kg**）阻斷抗體的療效持久度（durability）。
* **單次高劑量 REGN23415（35 mg/kg）**：
* 注射後 **第 4 天**，血清 T4 驟降，進入穩定的甲狀腺功能低下狀態（hypothyroidism）。
* 此抑制狀態維持約 **25 天**。
* 第 28 天後，藥效逐漸消退，血清 T4 重新回升至甲亢狀態。
* **單次高劑量半衰期延長抗體 REGN24493（35 mg/kg）**：
* 注射後 **第 4 天**，血清 T4 同樣大幅下降，進入穩定的甲狀腺功能低下狀態。
* 此抑制狀態維持長達約 **50 天**。
* 直至 **第 56 天** 後，阻斷效果才開始衰退並回升。
* **結論**：半衰期延長修飾的 REGN24493 將單次給藥的療效維持時間擴增了約一倍（從 ~25 天延長至 ~50 天）。
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### 總結
1. **模型建立**：透過長期給予自 GD 患者分離之強效 TSHR 刺激性抗體 M22，成功建立能重現 GD 與 TED 兩大核心臨床表徵（甲狀腺功能亢進與眼球突出）的小鼠模型。
2. **療效驗證**：重複給予 8 mg/kg 的阻斷抗體 REGN23415，能有效降低 M22 誘發的甲亢，使血清 T4 恢復至正常甲狀腺功能（euthyroid）水平。
3. **致病機制**：TSHR 的持續過度刺激足以單獨誘發眼凸，而阻斷 TSHR 則能預防眼凸，證實 **TSHR 是驅動眼凸的核心主導因子**。
4. **持久度突破**：單次 35 mg/kg 高劑量給藥下，原始抗體 REGN23415 可維持約 25 天的甲低狀態；而半衰期延長抗體 REGN24493 則可維持長達 **約 50 天** 的持續抑制效果。
5. **總結聲明**：Regeneron 研發之 TSHR 阻斷抗體具備 potential best-in-class 的療效、安全性與給藥靈活性，有潛力成為第一線從上游同時阻斷 GD 與 TED 病理驅動因子的疾病修飾藥物（disease-modifying agent）。
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### 現場問答
#### Q1：高劑量抗體導致甲狀腺功能低下（Hypothyroidism），臨床上如何處理？是否採用 Block-and-Replace 策略？
* **座長／聽眾提問**：小鼠模型顯示修飾後的抗體在大劑量下會導致甲狀腺功能低下，但臨床治療目標是讓患者恢復正常甲狀腺功能（euthyroid）。團隊是否打算進一步修飾抗體以達到不同的穩態，或者臨床應用上會考慮「阻斷與替代」（block-and-replace，即配合補充 levothyroxine）策略？
* **演講者（Mutayyaba Adnan）回應**：臨床策略上的考慮確實會傾向採用 **Block-and-Replace**（阻斷與替代）方法。因為臨床上不可能讓患者長期處於危險的甲低狀態，因此給予阻斷抗體的同時補充 levothyroxine 是合理的臨床戰略。此外，該模型對眼凸（proptosis）的改善效果非常令人振奮。
#### Q2：M22 誘發的小鼠模型中，是否有觀察到葛瑞夫茲病的其他病理特徵（如甲狀腺腫大或血管增生）？
* **Max Flynn（University of Wisconsin）提問**：在 M22 誘發的甲亢小鼠中，是否有觀察到 GD 的其他特徵，例如甲狀腺腫大（thyromegaly）或甲狀腺血管增生（increased vascularity）？阻斷抗體是否能逆轉這些改變？
* **演講者（Mutayyaba Adnan）回應**：在小鼠中未觀察到體重增加。解剖時則觀察到甲狀腺呈現超功能狀態（hyperfunctional），伴隨細胞增生（cell growth）。至於阻斷抗體是否能逆轉此改變，目前尚未確定，團隊將進一步評估。
#### Q3：臨床開發策略是否計畫同時切入葛瑞夫茲病（GD）與甲狀腺眼病變（TED）？
* **聽眾提問**：簡報中同時提及 GD 與 TED，未來的臨床試驗開發計畫是打算同時推進這兩個適應症嗎？
* **演講者（Mutayyaba Adnan）回應**：目前無法透露未公開的臨床開發細節，但團隊對於能夠以單一藥物同時治療 GD 與 TED 患者感到非常期待，這將能嘉惠更廣大的患者群體。
#### Q4：對於沒有甲狀腺功能亢進的甲狀腺眼病變患者（Euthyroid TED），治療策略為何？
* **Kerry Maryash（Indiana University）提問**：臨床上有許多僅有眼部病變（TED）但甲狀腺功能正常的患者（非甲亢性 TED），對於這類患者有何治療建議？
* **演講者（Mutayyaba Adnan）回應**：這是一個非常重要的臨床問題。關於針對甲狀腺功能正常之 TED 患者的特定應用策略，後續會與團隊的臨床總監（clinical director）溝通討論後給予答覆。
#### Q5：本抗體與市場上其他 TSHR 阻斷抗體（如 K170）或類固醇相比，效果如何？
* **Cayenne（Suterna）提問**：市場上亦有其他 TSHR 阻斷抗體（例如 K170），團隊是否有進行對頭比較？另外，在眼凸預防方面，是否有與類固醇（steroid）治療進行比較？
* **演講者（Mutayyaba Adnan）回應**：團隊曾測試市場上的其他競品；講者表示相信 Regeneron 的阻斷抗體具良好效力（potency）與人體安全性潛力，但本場未提供對頭比較數據。至於在小鼠模型中與類固醇進行眼凸療效比較，目前尚未完成。